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                詳說巖藻聚糖硫酸酯
                相關研究文獻資料

          1、巖藻聚糖和巖藻多糖的結構與功能的研究

          2、巖藻聚糖硫酸酯降血脂及抗氧化作用的研究

          3、褐藻糖膠的免疫調節作用
          4、褐藻糖膠治療動脈粥樣硬化臨床觀察
          藥效急性毒性實驗報告

          1、褐藻多糖硫酸酯與功能主治有關的主要藥效學試驗資料

          2、褐藻多糖硫酸酯藥效實驗結果

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

           

          第一部分 褐藻多糖硫酸酯藥效實驗結果
              褐藻多糖硫酸酯(FPS)抗血凝及降低削血液膽固醇的實驗報告

              實驗樣品:FPS:中國科學院海洋研究所提供
              肝素標準品(1mg相當于172個單位):中國藥品物制品檢定所發,批號5098609;
              藻酸雙酯鈉片(PSS):每片含50mg   市售藥品批  批號930223;
              甘露醇煙醇酯片:每片含0.2g   市售藥品  批號910607;
              實驗動物:
              家兔:(大耳白) 體重2.63.3kg   青島藥品檢驗所動物室
               小白鼠:(昆明種) 體重1822g   青島藥品檢驗所動物室   

          1、抗凝血實驗
          () 體外實驗法
              血漿的制備:取兔血用枸櫞酸鈉為抗凝劑成血漿
                       
          1%的氯化鈣溶液
              肝素標準品溶液:每1ml2個單位的生理氯化納溶液
                 
          FPS溶液:每1ml0.04mg生理氯化納溶液
              實驗:取0.8*3.8cm的玻璃管12支分成兩組,每組6支,以組為肝素標準品組,另一組為FPS組,分別按表中排列次序進行實驗(參照中國藥典1990年版附錄102頁)   
              1  肝素標準組


          (
          ml)

             

          1

          2

          3

          4

          5

          6

          漿

          0.50

          0.50

          0.50

          0.50

          0.50

          0.50

          肝素標準溶液

          0.05

          0.10

          0.15

          0.20

          0.30

          0.40

          生理氯化鈉溶液

          0.35

          0.30

          0.25

          0.20

          0.10

          0.00

          氯化鈣溶液

          0.10

          0.10

          0.10

          0.10

          0.10

          0.10

            2  褐藻多糖硫酸酯(FPS)

          ml

             

          1

          2

          3

          4

          5

          6

          漿

          0.50

          0.50

          0.50

          0.50

          0.50

          0.50

          FPS溶液

          0.05

          0.10

          0.15

          0.20

          0.30

          0.40

          生理氯化鈉溶液

          0.35

          0.30

          0.25

          0.20

          0.10

          0.00

          氯化鈣溶液

          0.10

          0.10

          0.10

          0.10

          0.10

          0.10

          兩組小管按順序加完后,立即混勻置37±0.5水浴中,并開始計算 時間觀察各管凝血時間,以靠近30分鐘時凝固管的較高濃度管為該次實驗的終點管,并以此管計算FPS相當于肝索單位數,結果經三次實驗結果的平均值為1mgFPS相當于77.2±2.8肝素單位。

          ()、體內實驗

          1、取家兔10只,分為四組,每組5(3只,雄2),第一組為肝素標準品組,第二組為FPS組,給藥前先測定每只家兔的正常血凝時間,然后分別給予靜脈注射每m1含肝素100單位的溶液2.0ml/kg和每mlFPS 1mg/ml的溶液3m1/kg,并測定注射后1、2、3、4、5、6,6個小時的血凝時間,結果肝素標準品組給藥前的凝血時間為2.6±0.19分,給予靜脈注射200單位/kg后,4小時內延長凝血時間均超過10分鐘,5小時仍十分顯著為6.0±0.71(P<0.01),6小時恢復接近正常(P>0.05)。FPS號組,給藥前的凝血時間為2.5±0.22分,給予靜脈注射3mg/kg后,3小時內延長凝血時間均超過10分鐘,5小時時仍十分顯著為4.1±0.24(P<0.01),6小時恢復正常(P>0.05)。

          2、小白鼠口服法:取體重1822g小白鼠50只,分為5組,每組10(雌雄各5),各組在給藥前饑餓4小時后預測正常血凝時間,然后口服給藥,第一組為空白對照組,給予口服水0.4m1(灌胃),第二組為陽性對照組,給予口服每m110mg的藻酸雙酯鈉溶液0.4ml(相當于200mg/kg),第三組為FPS高劑量組,給予口服每rnl10mg的溶液0.4m1(相當于200mg/kg),第四組為中劑量組,給予口服每rnl5mg的溶液0.4ml(相當于100mg/kg),第五組為低劑量組,給予口服每m12.5mg的溶液0.4m1(相當于50rng/kg),口服給藥后1.5小時、2小時和3小時分別測定其凝血時間,結果見下表3

          3  褐藻多糖硫酸酯(FPs)和對小白鼠(口服)血凝時間的影響(分)

          組別

          測血凝時間(小時)

          0

          1.5

          2.0

          3.0

          空白對照

          2.40±0.12

          2.40±0.10*

          2.40±0.07*

          2.20±0.11*

          FSS200mg/kg

          2.30±0.11

          4.90±0.27**

          3.60±0.13**

          2.30±0.08*

          高劑量200mg/kg

          2.30±0.11

          10.80±0.27**

          8.80±0.47**

          5.8±0.31**

          中劑量100mg/kg

          2.2.±0.08

          4.40±0.18**

          3.4±0.14**

          2.11±0.07*

          低劑量50mg/kg

          2.10±0.07

          2.20±0.08*

          2.20±0.08*

          2.11±0.07*

          注: *  P>0.05     **  P<0.01    

             實驗結果說明FPS給予小白鼠口服200mg/kg1.5小時,延長血凝時間作用最好,到3小時時仍有非常顯著的延長血凝時間的作用,中劑量l00mg/kg作用較高劑量弱,但其作用可維持2小時,50mg/kg沒有顯示延長血凝時間的作用。  

          2、降低血膽固醇作用

          取體重2225g小白鼠40只,分為4組,每組10(雌雄各5),第一組為空白對照組,每日給予水0.5ml灌胃,第二組為陽性對照組,每日給予50mg/ml甘露醇煙酸酯混懸液0.02ml/g(相當于1000mg/kg),第三組為FPS高劑量組,每日給予l0mg/ml的溶液0.02ml/g(相當于100mg/kg)。共實驗6天,每天灌胃一次,于最后一次灌胃后1小時,分別取血測定血清總膽固醇,結果見表4。

          4  褐藻多糖硫酸酯(FPs)對小白鼠(口服)血凝時間的影響(分)

          組別

          動物數(只)

          劑量 (mg/kg)

          血膽固醇 (mg/100ml)

          空白對照

          10

          0.5ml

          195.2±4.3

          甘露醇煙酸酯

          10

          1000

          169.1±1.5**

          高劑量

          10

          200

          166.5±4.0**

          低劑量

          10

          100

          191.0±11.4*

          注: *  P>0.05     **  P<0.01

          實驗結果說明小白鼠口服FPS200mg/kg具有非常顯著的降血總膽固醇的作用,而口服100mg/kg時則不顯示作用。

          小結與討論:

          本實驗測得1mgFPS其抗血凝作用與77.2肝素單位相當。給予家兔靜脈注射3mg/kg時,其延長血凝時間的作用可維持5小時(P<0.01),給予小白鼠口服200mg/kg,其延長血凝時間的作用可維持3小時(P<0.01),口服100mg/kg,可維持2小時(P<0.01),口服50mg/kg則不顯示抗凝作用(P>0.05)。給予正常小白鼠口服200mg/kg具有非常顯著的降血總膽固醇的作用(P<0.01)?诜100mg/kg則不顯示降血總膽固醇作用(P<0.05)。通過上述實驗結果可以說明FPS確具有較強的抗血凝和降血脂的作用。它對調整人體血脂代謝,改善高血脂癥,防治粥樣動脈硬化及改善心腦血液循環方面,都有明顯療效。

          第二部分 急性毒性試驗結果

          褐藻多糖硫酸酯(FPS)的急性毒性實驗

           I  樣品來源:中國科學院海洋研究所提供FPS
           
          П  實驗動物:小白鼠(昆明種)體種1822g  
                          大白鼠(Wister)體重150170g
           
          Ш  實驗樣品的處理:取樣6g加水研磨使全量成30ml的均漿(濃度為 200mg/m1)備用。
           
            實驗   

          (一)口服法   
            1)小白鼠法:取小白鼠20(雌雄各10),每只小白鼠按體重計算每次給予樣品均漿液0.02ml/g灌胃,共給予兩次(間隔4小時)總劑量為0.04ml/s(相當于8000mg/kg),觀察10天,動物均健康生存,經解剖觀察內腔未發現異常。本品對小白鼠口服的最大耐受量在8000mg/kg以上,相當于臨床預計用量100mg4000倍以上。
             2)大白鼠法:取大鼠20(雌雄各10),每只大白鼠按體重計算每次給予樣品均漿液1.5ml100g灌胃,共給予兩次(間隔4小時)總劑量為3.0ml/100g(相當于30ml/kg6000mg/kg,),經觀察10天,動物均健康生存,經解剖觀察內臟未發現異帶。本品對大白鼠口服的最大耐受量在6000mg/kg以上,相當臨床預計用量100mg3000倍以上。

          (二)腹腔給藥法
             實驗樣品的處理:取樣品2g加注射用水研磨使用20ml的均漿液(100mg/ml)備用。
          1)小白鼠法:取小白鼠20(雌雄各10),每只小白鼠按體重計算給予腹腔注射樣品均漿液0.04ml/g(相當于40ml/kg4000mg/kg),經觀察10天,動物均健康生存,經解剖觀察內臟未發現異常。本品對小白鼠腹腔注射的最大耐受量在4000mg/kg以上。
          2)大白鼠法:取大白鼠20(雌雄各10),每只大白鼠按體重計算給予腹腔注射樣品均漿液4ml/100g(相當于40ml/kg4000mg/kg),經觀察10天,動物均健康生存,經解剖觀察內臟未發現異常。本品對大白鼠腹腔注射的最大耐受量在4000mg/kg以上。

          V 小結: FPS對小白鼠口服的最大耐受量大于8000mg/kg,相當于臨床預計用量100mg4000倍。對大白鼠口服的最大耐受量大于6000mg/kg,相當于臨床預計量100mg3000倍。對小白鼠和大白鼠腹腔注射的最大耐受量均大于4000mg/kg。

                 第三部分 FPS對鼠傷寒沙門氏菌回復突變試驗(Ames試驗)

          (一)材料與方法
          1)菌株:為組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門氏菌四株、TA39、TA98、TA100、TA102,代謝活化系統為S9,由北京市衛生防疫站提供,經生物學特性鑒定均符合要求。
          2)劑量:FPS最高劑量為5000μg/mL,下推設4個劑量分別為500μg/mL、50μg/mL、5μg/mL、0.5μg/mL,用蒸餾水作溶劑。  
          3)對照組:陰性對照組 用蒸餾水,陽性對照組TA97、TA98用二一氨基芴20μg/mL,TA100用迭氮鈉1.5μg/mL,TA102用絲裂霉素C 0.5μg/mL。
          4)方法:按Ames沙門氏菌誘變性試驗標準方法進行,再按活化和非活化標準平板摻入法進行試驗,即在加S9和不加S9不同條件下作平行測試,每個劑量做三mL,48h觀察結果,計算回變菌落數(X±S),實驗重復一次。
          5)評價標準:若被試樣品所誘變的回復菌落數(X±S)超過自發回變數2倍者,且有劑量反應關系,并能在一個劑量上重復,有統計學意義即可判為陽性。
          (二)結果與討論
            試驗結果如表5所示,自表5可見陽性對照回變菌落數均超過自發回變的2倍以上,而FPS誘變試驗的回變菌落數均未超過自發回變的2倍。因此可認為FPS對基因無致突變作用。

          FPSAmes試驗測試結果

          μg/mL

          TA97

          TA98

          TA100

          TA102

          S9

          + S9

          S9

          + S9

          S9

          + S9

          S9

          + S9

          5000

          139±18.2

          143±14.2

          25±2.6

          40±5.6

          160±16.8

          196±
          24.6

          240±
          10.5

          296±
          18.5

          500

          127±9.6

          160±12.9

          39±5.1

          47±7.8

          158±12.7

          178±
          24.1

          180±
          24.5

          234±
          8.2

          50

          133±5.0

          177±8.9

          28±7.2

          38±8.4

          153±8.3

          169±
          12.7

          236±
          18

          385±
          20.5

          5

          135±11.3

          140±21.4

          32±4.6

          47±3.4

          125±12.7

          133±
          24.1

          280±
          17.1

          320±
          23.4

          0.5

          138±12.9

          146±27.4

          38±3.5

          51±9.6

          111±10.8

          180±
          21.6

          324±
          38.6

          402±
          35.8

          自發
          回變

          40±5.0

          180±21.6

          69±7.6

          71±3.8

          180±7.6

          186±
          10.8

          315±
          7.2

          360±
          12.4

          陽性
          對照

          440±13.2

          510±9.8

          179±12.5

          230±14.1

          560±21.8

          621±
          25.6

          1400±
          53.2

          1600±
          48.6

                           第四部分  初步臨床應用簡況

               在經過急性毒性實驗和藥效實驗以后,經過半年多的臨床應用,已直接觀察病例50例,其中高血壓、高血脂癥、動脈硬化(無并發癥)的有40例,年齡在5278歲之間,口服褐藻多糖硫酸酯每次100mg(膠囊型)每日三次,服藥后,無不良反應,也沒有胃腸道反應,無任何毒副作用,均有不同程度療效,自感癥狀頭痛、頭暈明顯減輕,食欲增加,自感有力,頭腦清醒,記憶有所恢復。

             1、X X,干部,男77歲,患尿毒病,腦動脈硬化,左房粘液瘤,冠狀動脈供血不足,長期住院治療,難以自理,服用FPS一個多月,中風預報()血尿素氮由11.4mmol/L,降至為6.8mmol/L,血膽固醇5.5mmol/L降至4.8mmol/L,三酸甘油酯1.35mmol/L降至0.75mmol/L,記憶好,可自由活動,血糖已控制,腎功能接近正常。   
            2、X X,男,62歲,工人,頭痛、頭暈17年,Bp持續在160180/110120mmHg,心電圖示動脈供血不足,服藥后一個月,Bp160/1l0mmHg降至140/100mmHg,血膽固醇7.32mmol/L降至4.8mmol/L,三酸甘油酯1.98mmol/L降至1.35rnmol/L。
            3、X X,女,62歲,干部,患高血壓30年,近4年頭暈加劇,不能外出活動,服多種藥物無好轉,Bp190/90mmHg,眼底示動脈硬化,診為高血壓動脈硬化,服FPS一個月,Bp190/90mmHg降至130/90mmHg,血膽固醇6.44mmol/L降至5.36mmol/L,三酸甘油酯2.9mmol/L降至1.65rnmol/L,無自覺不適,可參加社會活動,停服一切降壓藥。
            4、X X,女,54歲,腦動脈硬化,反復胸悶,憋氣,頭暈,惡心,服藥后,血壓由148/90mmHg降至100/90mmHg,血流速大腦中動脈由103cm/sec減為95cm/sec,右大腦中動脈39cm/sec提高為59cm/sec,血液中的尿素氮由7.7mmol/L降至4.07mmol/L,現可以正;顒。
            5、X X,女,52歲,患高血壓20年,血壓高達190/120mmHg,不能自由活動,不敢睜眼,服藥一個月,血壓降為135/90mmHg,病情明顯好轉,還能從事輕的家務勞動。
           6、X X,男,68歲,干部,反復頭暈、胸悶20年,92年發生“腦血栓”,病情加重,反應遲純,肢體活動不靈,診斷為高血壓動脈硬化,服藥后,Bp180/130mmHg降至130/90mmHg,血膽固醇6.32mmol/L降至4.35mmol/L,三棱甘油酯由2.35mmol/L降至1.61mmol/L。
            7、X X,男,64歲,退休工人,反復頭痛、頭暈13年,食欲亢進2年,診斷為動脈硬化癥糖尿病,不能參加工作,服藥后,Bp135/95mmHg降至130/90mmHg,膽固醇4.35mmol/L降至3.85mmol/L,三酸甘油酯由1.98 mmol/L降至1.5mmol/L,血糖7.9 mmol/L降至6.69mmol/L,停藥后,血壓穩定,可從事浴室管理工作。
            8、X X,男,17歲,學生,因反復浮腫半年,查尿蛋白帶診斷為腎病綜合癥,保守常規治療無好轉,服藥后,血膽固膽醇8.88mmol/L降至為6.85mmol/L,三酸甘油酯1.74mmol/L降至為1.47mmol/L,尿蛋白3g/L降為0.7g/L,自覺癥狀好,已復學。
           另外,對治療尿毒癥也有明顯的療效,共觀察尿毒癥患者10例,年齡1473歲之間,服藥后,可延緩病情,有利于腎功能的恢復。
            9、X X,女,44歲,患慢性腎炎、尿毒癥,持續惡心,嘔吐,服藥二個月后,肌酐由800umol/L降至為200umol/L以下,可從事家務活動。
            10、X X,男,27歲,患尿毒癥,血肌酐1000umol/L以上,每周血透析3次,服藥40天,化驗血肌酐降為200umol/L,并可上半天班。
            11、焦X X,女,14歲,單純性腎病(二型),全身浮腫,血壓高,腎功能損壞,服藥二個月后,血壓由160/80mmHg降至120/70mmHg,體重由140斤降為100斤,肌酐由600umol/L下降至200umol/L以下,纖維蛋白也由600mg/L降為200mg/L,出院后又繼續服藥二個月,腎功能已恢復正常,可參加適量活動。

           

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